《刘秀走南阳之吴汉杀妻》是一部充满戏剧性的琴书作品，讲述了刘秀在南阳招兵买马复国的过程中，吴汉与妻子王兰英之间因家国恩怨而引发的悲剧。
故事起始于刘秀欲潜入潼关，却在店中遇险，幸得秦忠与店婆的巧妙救助，最终偕同秦忠潜往马府。马成父女闻知刘秀到来，对复兴汉室充满期望，决定交出传国宝玉玺以助刘秀号令四方，共同讨伐王莽。
然而，马成之子马家驹行为不端，盗走玉玺欲献与王莽。其妹家凤发现后，策马追赶，苦劝不成，最终兄妹相搏，家驹被杀，玉玺被家凤夺回。吴汉闻讯赶来，欲夺玉玺。在相持间，秦忠赶到并救走家凤，但自身再度被擒。吴汉将马成绑至自己府内，欲夺玉玺，一齐献给王莽。
吴母得知此事后，悲愤难言，遂与马成、秦忠一起向吴汉讲述家世及存忠剑的来由，使吴汉明白恩仇，决心投向汉室。然而，为了使吴汉与王莽彻底割裂，吴母下令吴汉持剑斩杀其妻王兰英。夫妻之间恩爱深厚，使吴汉对此命令难以遵从，但吴母以死相胁，吴汉只得听令而行。
在经堂中，王兰英正在为一家祈福，吴汉虽来，但屡难下手。王兰英虽难舍与吴汉的深恩深爱，但为成全丈夫之志，她最终夺剑自刎。吴母见状，亦自缢而死。
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